Catàleg de proves

Diagnòstic molecular coagulopaties congènites per NGS: Hemofília A

Codi: 70801

Tipus: Estudi de coagulopaties congènites

Informació tècnica

Utilitat

Identificar el defecte molecular al F8 en pacients diagnosticats de Hemofília A.

HEMOFÍLIA A

L'HA és la forma més freqüent d'hemofília amb una prevalença estimada de 1:5.000 homes. Aquest trastorn hemorràgic està causat per una deficiència de factor VIII (FVIII) de la coagulació. Segons els nivells de FVIII es distingeixen tres formes d'HA: severa si l'activitat biològica del FVIII és <1%; moderada si l'activitat del FVIII està entre 1-5%; lleu si l'activitat del FVIII està entre 5-40%. Les manifestacions clíniques més freqüents són les hemorràgies a les articulacions (hemartrosi) i als músculs (hematomes). La freqüència i severitat dels sagnats és inversament proporcional a la quantitat de FVIII que hi ha al plasma.

L'HA presenta una herència recessiva lligada al cromosoma X, de manera que els homes són afectes i les dones són portadores de la patologia. Aquest trastorn està causat per mutacions al gen F8 que poden afectar a l'activitat del FVIII de la coagulació o reduir la quantitat d'aquesta proteïna. Actualment s'han identificat més de 1.300 alteracions genètiques al F8, entre les quals s'inclouen canvis d'un sol nucleòtid i delecions o insercions de varis nucleòtids. No obstant, en els casos d'HA greu la mutació més freqüent és la inversió de l'intró 22, present en un 50% dels pacients. Aquesta mutació succeeix per una recombinació homòloga entre el F8 i l'extrem telomèric del cromosoma X degut a l'alta homologia que existeix entre ambdues seqüències.

Aplicació d'un panell de múltiples gens que es basa en l'amplificació simultània dels exons i les regions intròniques flanquejants per a la seva seqüenciació mitjançant tècniques de seqüenciació massiva (NGS) i permet realitzar l'estudi molecular simultani dels gens relacionats amb les coagulopaties congènites i trastorns hemorràgics hereditaris entre els quals es troba el gen del Factor VIII (F8).

Mètode

Seqüenciació massiva (NGS) dels exons i les regions intròniques flanquejants del F8.

Seqüenciació tradicional de Sanger per comprovar la/les mutació/ns detectades per NGS en els pacients diagnosticats amb HEMOFÍLIA A, per tal d'arribar a un resultat inequívoc, analitzant la regió concreta on es troba la variant.

En el cas de no identificar cap mutació potencial o definitivament causant de la patologia s'informarà i discutirà amb l'equip mèdic demandant de la prova la possibilitat de realitzar estudis complementaris.

Valors de referència

No aplica.


Algoritme diagnòstic

Temps de resposta

30 dies laborables.

Informació sobre l’espècimen

Mostra: Sang total

Tub: Tub EDTA K3 5-10 ml si es tracta d'una mostra de sang

Volum mínim imprescindible: 3 ml

Estabilitat:

  • A temperatura ambient: 4 dies

  • En refrigeració: 10 dies

Instruccions de transport: Preferiblement a temperatura ambient

Motiu de rebuig: Mostra coagulada i/o incorrectament identificada.

Altres tipus de mostres acceptades:

  • DNA purificat, mínim 300 ng (30 ng/μL).

  • Mucosa bucal: contactar amb el laboratori per consultar especificacions de recollida de la mostra.

Informació administrativa

Codi BST: 70801

Codi BST antic: LRD2833

Descripció de la prova: Diagnòstic molecular de coagulopaties congènites per NGS: Hemofilia A.

Sinònims: Estudi genètic de Hemofília A, seqüenciació del F8.

Secció: Coagulopaties Congènites.

Tarifa BST: Consultar les tarifes actualitzades aquí.

Al full de petició d'estudi molecular s'ha de marcar la casella HEMOFÍLIA A i omplir les dades fenotípiques de les que es disposi.

Perfils: 70801

Referències

  • Peter J Hulick. Next-generation DNA sequencing (NGS): Principles and clinical Applications. Waltham, MA: UpToDate Inc. https://www.uptodate.com

  • DNA Sequencing by Capillary Electrophoresis. Applied Biosystems Chemistry Guide. Second Edition.

Base de dades de mutacions

Descarregar fitxa en pdf