Informació tècnica
Utilitat
Aquesta prova quantifica per citometria de flux les cèl·lules que són positives per:
- Receptor de membrana CD3 (antigen limfòcits T)
- Receptor de membrana CD45 (antigen leucocitari comú)
- 7-aminoactinomicina D (7AAD, marcador de viabilitat)
És una determinació que s’utilitza pel control de qualitat de productes per transplantament de progenitors hematopoiètics (moll d’os i leucoafèresis) així com productes de Teràpies Avançades basades en limfòcits (línies de Limfòcits T antivirals i Limfòcits infiltrants de tumors).
Mètode
Citometria de flux amb marcatge d’anticossos monoclonals (CD45 i CD3) marcats fluorocroms específics i 7AAD per la viabilitat. Els anticossos s’uneixen a les cèl·lules que expressen CD45 i/o CD3, permeten separar-les de la resta de cèl·lules. El 7AAD s’uneix al DNA de totes les cèl·lules mortes. Els valors de recompte s’obtenen mitjançant l’addició de microesferes de recompte de concentració coneguda.
Algoritme diagnòstic
No aplica
Resultats
Els resultats són quantitatius. Les concentracions de CD3 i CD45 poden ser molt variables en funció del tipus de mostra/producte i de si provenen d’un donant sa o d’un pacient. Pel que fa a la viabilitat cel·lular en productes de teràpia cel·lular els valors esperats són els següents:
| Mostra | Viabilitat CD45 | Viabilitat CD3 |
|---|---|---|
| Sang perifèrica, limfoafèresis o Progenitors en fresc | ≥95% | ≥95% |
| Limfoafèresis o Progenitors descongelats | ≥70% | ≥70% |
NOTA: Aquests valors són orientatius, segons les característiques de la mostra, aquests valors poden variar.
Pels productes de teràpia cel·lular avançada els criteris associats estan definits en els corresponents Investigational Medicinal Product Dossiers (IMPDs).
Precaucions
No aplica
Temps de resposta
1 dia.
Informació sobre l’espècimen
Mostra: Sang perifèrica, moll d’os, Leucoafèresis.
Tub: Tub EDTA K3 (sang perifèrica) o Tub sense additiu (mostres anticoagulades).
Volum mínim: 0.5mL
Estabilitat:
- A temperatura ambient: 1 dia (mostres en fresc)
- En refrigeració: 1 dia (mostres descongelades)
- Criopreservat entre -156ºC i -196ºC: 20 anys
Instruccions de transport:
- Sang perifèrica i moll d’os, preferiblement a temperatura ambient
- Sang de cordó umbilical i aféresis, preferiblement refrigerades a 2-8ºC.
- Mostres descongelades, refrigerades a 2-8ºC.
Motiu de rebuig: Mostra molt hemolitzada o amb coàguls.
Informació administrativa
Codi BST: 20800
Codi BST antic: CEL006
Descripció de la prova: Recompte i viabilitat de cèl·lules CD45+ i CD3+
Sinònims: Quantificació de CD45+/CD3+
Secció: Cel·lular
Tarifa BST: Consultar les tarifes actualitzades aquí.
Perfils
Aquesta prova es pot sol·licitar sola, però també es realitza dins de perfils.
Referències
- NCF Parte IV: Directrices sobre normas de correcta fabricación específicas para Medicamentos de Terapia Avanzada.
- FACT-JACIE International Standards for Cellular Therapy Product Collection, Processing, and Administration.
