Tipificació HLA-A alta resolució

Informació tècnica

Utilitat

La tipificació HLA per alta resolució ens permet determinar el tipatge HLA a nivell al·lèlic (4 dígits) de:

• Pacients candidats a trasplantament de progenitors hematopoètics.
• Familiars idèntics de malalts candidats a trasplantament de progenitors hematopoètics.
• Registre de donants voluntaris.
• Ampliació de tipificació HLA en donants voluntaris.
• Registre i verificació d’unitats de sang de cordó umbilical.
• Confirmatori pre-trasplantament de donant i receptor.

Mètode

La tècnica PCR-NGS (estratègia Long i estratègia Short) permet la tipificació HLA d’alta resolució de gens HLA de classe I i II i de gens HLA no clàssics. Aquesta tècnica consta de diverses fases: amplificació dels gens HLA d’interès mitjançant PCR, preparació de llibreries, seqüenciació i anàlisi de resultats.

Amb l’estratègia Long (fragments llargs) s’obté la seqüenciació del gen complert mentre que amb l’estratègia Short (fragments curts) se seqüencien els exons 2, 3 i 4 dels gens HLA-A, -B i -C i d’exons 2 i 3 dels gens HLA-DRB1, -DQB1, -DPB1, -DQA1 i -DPA1.

La tècnica PCR-SBT permet la tipificació HLA d’alta resolució d’un gen HLA aïllat. Aquesta tècnica consta de dues fases: amplificació dels exons dels gens HLA d’interès mitjançant PCR i reacció de seqüenciació dels productes amplificats. Finalment, les seqüències són analitzades mitjançant electroforesi. Se seqüencien els exons 2, 3 i 4 del gen HLA-A.

Algoritme diagnòstic

No aplica.

Resultats

Amb la tipificació d’alta resolució, per a cada gen HLA s’obtenen dos resultats, per exemple: HLA-A*02:01 A*26:01.

Temps de resposta

• Pacient o familiars de pacient candidat a trasplantament de progenitors hematopoètics: 20 dies.
• Registre de donants voluntaris: 20 dies.
• Ampliació de tipificació HLA en donants voluntaris: 10 dies.
• Registre d’unitats de sang de cordó umbilical: 20 dies.
• Verificació d’unitats de sang de cordó umbilical: 20 dies.
• Confirmatori pre-trasplantament de donant i receptor: 20 dies.

Informació sobre l’espècimen

Mostra: Sang total.

Tub: Tub EDTA K3 4 ml.

Volum mínim: 500µl.

Estabilitat:

• En refrigeració: 2 setmanes.
• A -20ºC: a partir de 2 setmanes.

Instruccions de transport: Preferiblement a temperatura ambient.

Motiu de rebuig: Mostra coagulada.

Informació administrativa

Codi BST: 71807.

Codi BST antic: LRD2019.

Descripció de la prova: Tipificació HLA-A alta resolució.

Secció: Histocompatibilitat i Immunogenètica.

Tarifa BST: Consultar les tarifes actualitzades.

Perfils

La prova HLA-A alta resolució està inclosa en els següents perfils:

Referències

• Manual dels “Standards for Histocompatibility Testing” de l’EFI (darrera versió).