Reactivitat antiviral de cèl·lules T mitjançant ELISPOT
Codi: 22801, 22804, 22803, 22802, 22800
Tipus: Control de qualitat de medicaments de teràpia avançada
Informació tècnica
Utilitat
Aquesta determinació s’utilitza per l’avaluació de la resposta cel·lular T específica contra diferents virus com el Citomegalovirus (CMV), Virus d’Epstein-Barr (EBV), Adenovirus (ADV), virus BK (BKV) i virus JC (JCV), mitjançant la tècnica ELISPOT en mostres de donants i pacients, així com en l’avaluació de l’especificitat de limfòcits en cultiu tant en l’àmbit assistencial com de recerca.
Mètode
L’ELISPOT (Enzyme Linked Immuno SPOT assay) és una tècnica quantitativa basada en la immunoabsorció lligada a enzim i dissenyada per comptar cèl·lules secretores de citocines, en aquest cas, IFNγ. Les cèl·lules mononucleades aïllades de sang perifèrica o els limfòcits en cultiu s’estimulen amb el pèptid viral específic (PepTivator®CMV pp65, PepTivator®CMV IE-1, PepTivator®AdV5 Hexon, PepTivator®EBV Consensus, PepTivator®EBV EBNA1, PepTivator®BKV LT, PepTivator®BKV VP1, PepTivator®JCV LT, PepTivator®JCV) durant 12-24h, l’IFNγ secretat es captura i detecta, i es compta el número de Unitats Formadores d’Spots (SFU) que s’han generat. Cada SFU correspon a una cèl·lula secretora d’IFNγ.
Algoritme diagnòstic
En cas de requerir augmentar la sensibilitat de la tècnica en cèl·lules aïllades de sang perifèrica, es pot realitzar un cultiu previ de preactivació durant 5-7 dies amb presència de l’antigen viral i IL-2 (prova 22815), i al finalitzar el cultiu, realitzar l’avaluació de la reactivitat mitjançant ELISPOT.
Resultats
Els criteris de positivitat són els següents:
| Virus testat | Criteri de conformitat |
|---|---|
| CMV | ≥20 SFU |
| ADV | ≥10 SFU |
| EBV | ≥10 SFU |
| JCV | ≥10 SFU |
| BKV | ≥10 SFU |
Precaucions
No aplica.
Temps de resposta
4 dies.
Informació sobre l’espècimen
Mostra: Sang perifèrica, suspensions cel·lulars procedents de cultius.
Tubs: Tub Heparina Liti.
Volum mínim: 20 mL de sang perifèrica.
Estabilitat: A temperatura ambient 24 hores.
Instruccions de transport: Temperatura ambient.
Motiu de rebuig: Mostra molt hemolitzada o amb coàguls.
Informació administrativa
Codi BST: 22801 (ADV), 22804 (BK), 22803 (CMV), 22802 (EBV), 22800 (Altres).
Codi BST antic: CEL027
Descripció de la prova: Reactivitat antiviral mitjançant ELISPOT.
Sinònims: Avaluació de la resposta específica contra virus de les cèl·lules T.
Secció: Cel·lular
Tarifa BST: Consultar les tarifes actualitzades aquí.
Perfils
Aquesta prova es pot sol·licitar sola, però també es realitza dins de perfils.
Referències
- Anthony DD, Lehmann PV. T-cell epitope mapping using the ELISPOT approach. Methods. 2003 Mar;29(3):260-9. doi: 10.1016/s1046-2023(02)00348-1. PMID: 12725791.
- NCF Parte IV: Directrices sobre normas de correcta fabricación específicas para Medicamentos de Terapia Avanzada.
