Validació de matrius per detecció de Mycoplasma (qPCR)

Informació tècnica

Utilitat

La determinació de contaminació per Mycoplasma en el material de partida, productes intermedis i productes finals de medicaments cel·lulars, és necessària como control de qualitat del procés productiu, segons les Normes de Correcta Fabricació (NCF).

La Farmacopea Europea preveu en el capítol 2.6.7 que es puguin utilitzar mètodes molecular de qPCR per detectar Mycoplasma.

Segons la Farmacopea Europea i les normes de correcta fabricació, abans de realitzar el control de Mycoplasma d'un medi, reactiu o producte cel·lular, cal validar que la matriu no interfereix amb el mètode de control, produint falsos resultats positius o falsos resultats negatius. Per aquest motiu, cal fer la validació de la matriu abans d'emprar el mètode de qPCR de Mycoplasma.

Mètode

Seguint Farmacopea Europea, es valida:

• L'especificitat (absència de resultats falsament positius)

• La sensibilitat (capacitat de detecció de 10 unitats formadores de colònies CFU o menys) de les 6 soques recomanades per la Farmacopea Europea

• La reproductibilitat (es realitzen 2 rèpliques)

• L'absència d'inhibició de la PCR (control intern)

Es segueix el capítol 2.6.7de la Farmacopea Europea.

El codi de les validacions al Banc de Sang i Teixits és V-LC-027.

Algoritme diagnòstic

No aplica.

Resultats

El resultat esperat és:

• Un resultat NEGATIU de Mycoplasma en el control negatiu (sense Mycoplasma)

• Un resultat POSITIU de Mycoplasma en el control positiu (amb Mycoplasma)

• Un resultat POSITIU en l'amplificació del control intern

• Un resultat POSITIU de Mycoplasma en les mostres (matriu amb soca de Mycoplasma afegida, per a cada una de les 6 soques testades)

Aquest resultat esperat indica que la matriu no interfereix i que es pot fer el control de Mycoplasma per qPCR. Qualsevol desviació respecte al resultat esperat està fora d'especificacions i s'ha d'investigar.

Precaucions

No aplica.

Temps de resposta

• 10 dies

Informació sobre l’espècimen

Mostra: Producte, medi o reactiu

Tubs: Tub estèril

Estabilitat: Congelat 1 mes.

Instruccions de transport: Preferiblement congelat.

Motiu de rebuig: Mostra no identificada, etiqueta il·legible, etc.

Informació administrativa

Codi BST: 75801

Codi BST antic: CEL056

Descripció de la prova: Validació de matrius per detecció de Mycoplasma

Sinònims: Validació Mycoplasma

Secció: Microbiologia

Tarifa BST: Consultar les tarifes actualitzades aquí.

Perfils
No aplica

Referències

• Farmacopea Europea 11ena edició

Qualitat

El BST té les certificacions de qualitat ISO 9001, ISO 14001, OSHAS 18001 i el segell d'Excel·lència Europea 500+. El BST està acreditat per CAT, JACIE-FACT, FACT-NETCORD i EFI, compleix les directrius de les Normes de Correcta Fabricació i les Normes de Correcta Distribució.