Validació de matrius per control d'esterilitat (BACTALERT)

Informació tècnica

Utilitat

La contaminació bacteriana o fúngica dels productes d'origen humà (SoHo) pot produir morbiditat i mortalitat en els receptors. Les possibles fonts de contaminació inclouen bacterièmia asimptomàtica del donant en el moment de la donació i l'execució incorrecta de les tècniques asèptiques durant la producció.

La Farmacopea Europea preveu en el capítol 2.6.27 que es puguin utilitzar mètodes automàtics de control d'esterilitat. El sistema BACT/ALERT® utilitza un principi de detecció basat en el diòxid de carboni generat pel creixement microbià associat al metabolisme dels substrats del medi de cultiu, que es tradueix en un canvi de pH, i finalment, provoca un canvi de color irreversible de l'indicador del fons del flascó. Aquest sistema és avantatjós pel que fa a la rapidesa que proporciona en la detecció i recuperació microbiana, ja que s'obtenen els resultats en un temps màxim de 14 dies a través de la lectura continuada i, a més, la notificació de mostres positives és immediata. Les mostres a analitzar es sotmeten a una manipulació mínima ja que només es necessita inocular els flascons i introduir-los a l'armari BACT/ALERT per a la seva incubació. La lectura del color és automàtica, no hi ha interferències per terbolesa i és un mètode no destructiu que permet una identificació microbiana posterior i antibiograma, si s'escau.

Segons la Farmacopea Europea i les normes de correcta fabricació, abans de realitzar el control d'esterilitat d'un medi, reactiu o producte cel·lular, cal validar que la matriu no interfereix amb el mètode de control, produint falsos resultats positius o falsos resultats negatius. Per aquest motiu, cal fer la validació de la matriu abans d'emprar el mètode BACT/ALERT.

Mètode

Seguint Farmacopea Europea, es valida:

• L'especificitat (absència de resultats falsament positius)

• La sensibilitat (capacitat de detecció de 100 unitats formadores de colònies CFU o menys) de les soques recomanades per la Farmacopea Europea

• La reproductibilitat (es realitzen 3 rèpliques) del BACT/ALERT per a la matriu en estudi.

A més, es verifica amb un test de promoció del creixement que els flascons i medis de cultiu emprats són fèrtils i no estan contaminats.

En cas de productes cel·lulars es segueix el capítol 2.6.27 de la Farmacopea Europea. En cas de medis i reactius es segueix el capítol 2.6.1 de la Farmacopea Europea.

El codi de les validacions al Banc de Sang i Teixits és V-LC-020 i V-LMB-007.

Algoritme diagnòstic

En cas de detectar creixement microbià, es procedeix a fer una tinció de Gram, sembrar en placa i fer la identificació del microorganisme per MALDI-TOF.

Resultats

El resultat esperat és:

• Un resultat NEGATIU de BACT/ALERT en el control negatiu (flascó sense microorganisme inoculat)

• Un resultat POSITIU de BACT/ALERT i la detecció de les soques corresponents en els controls positius (flascó amb microorganisme inoculat)

• Un resultat POSITIU de BACT/ALERT i la detecció de les soques corresponents en les mostres (flascó amb matriu i microorganisme inoculat)

Aquest resultat esperat indica que la matriu no interfereix i que es pot fer el control d'esterilitat amb BACT/ALERT. Qualsevol desviació respecte al resultat esperat està fora d'especificacions i s'ha d'investigar.

Precaucions

Cal realitzar la validació de la matriu abans de realitzar per primera vegada un control d'esterilitat per BACT/ALERT a una matriu (reactiu, medi, producte cel·lular, etc.)

Temps de resposta

• 20 dies

Informació sobre l’espècimen

Mostra: Matriu que es vol validar

Tubs: Flascó BACT/ALERT (veure detall a la Fitxa de la prova Control d'esterilitat BACT/ALERT)

Estabilitat: Transportar tan aviat com sigui possible al laboratori.

Instruccions de transport: Temperatura ambient.

Motiu de rebuig: Mostra no identificada, mostra insuficient, etc.

Informació administrativa

Codi BST: 61801 per productes cel·lulars i 61800 per reactius

Codi BST antic:

Descripció de la prova: Perfil-Validació BACT/ALERT productes i Perfil-Validació BACT/ALERT reactius

Sinònims: Validació de matriu per BACT/ALERT

Secció: Microbiologia

Tarifa BST: Consultar les tarifes actualitzades aquí.

Perfils
No aplica

Referències

• Guide to the quality and safety of tissues and cells for human application. 5th edition EDQM, 2022

• Farmacopea Europea 11ena edició, 2023

• NCF: Guía de Normas de Correcta Fabricación de Medicamentos de Uso Humano y Veterinario. Anexo 1

• NCF Parte IV: Directrices sobre normas de correcta fabricación específicas para Medicamentos de Terapia Avanzada.

• Guia de l'usuari del BACT/ALERT 3D (Biomérieux)

• Instruccions dels flascons iFA Plus, iFN Plus, FA Plus, FN Plus, BPA, BPN, iAST, iASN

Qualitat

El BST té les certificacions de qualitat ISO 9001, ISO 14001, OSHAS 18001 i el segell d'Excel·lència Europea 500+. El BST està acreditat per CAT, JACIE-FACT, FACT-NETCORD i EFI, compleix les directrius de les Normes de Correcta Fabricació i les Normes de Correcta Distribució.