Mycoplasma qPCR

Informació tècnica

Utilitat

Detecció de contaminacions per Mycoplasma en mostres de teràpia avançada, productes cel·lulars, línies cel·lulars o sobrenedants de cultiu, mitjançant un mètode d'amplificació per qPCR Real Time, validat per Farmacopea Europea.

La determinació de contaminació per Mycoplasma en el material de partida, productes intermedis i productes finals de medicaments cel·lulars, és necessària como control de qualitat del procés productiu, segons les Normes de Correcta Fabricació (NCF).

Mètode

Mycoplasma és un gènere de bacteris que no tenen paret cel·lular. Aquesta característica fa que siguin resistents a molts antibiòtics, com la penicil·lina. Algunes espècies de Mycoplasma poden ser causants de patologies en humans. A més aquests bacteris es poden trobar contaminant material de laboratori i cultius cel·lulars, reduint el rendiment i la viabilitat del cultiu, sense que la contaminació pugui ser detectada al microscopi. Segons la Farmacopea Europea hi ha diversos mètodes admesos per detectar Mycoplasma. Al BST s'utilitza la qPCR (reacció en cadena de la polimerasa quantitativa), tècnica que permet amplificar DNA específic en temps real, utilitzant la fluorescència com a mètode de quantificació.

Per realitzar l'extracció dels àcids nucleics s'utilitza el kit QIAamp blood DNA extraction kit (Qiagen). Per la qPCR s'utiliza el kit Venor GeM qEP (Minerva Biolabs), amb tecnologia de sondes TaqMan. La sensibilitat de la tècnica és de ≤10 CFU/mL. El kit inclou un control intern que permet garantir que no hi ha inhibició de la PCR. A més, a cada sèrie de treball s'incorporen controls positius i negatius.

Aquest mètode ha estat validat pel Banc de Sang i Teixits i el codi de validació del mètode és V-LC-030 i el codi de la validació de cada una de les matrius és V-LC-027.

Algoritme diagnòstic

No aplica.

Resultats

El resultat s'informen com POSITIU o NEGATIU.

Precaucions

No aplica.

Temps de resposta

• 10 dies (si és urgent es pot fer en 2 dia, contactar amb el Laboratori)

Informació sobre l’espècimen

Mostra: Producte, medi o reactiu

Tubs: Tub estèril

Estabilitat: Congelat 1 mes.

Instruccions de transport: Preferiblement congelat.

Motiu de rebuig: Mostra no identificada, etiqueta il·legible, etc.

Informació administrativa

Codi BST: 75800

Codi BST antic: CEL055

Descripció de la prova: Mycoplasma per qPCR

Sinònims: Mycoplasma

Secció: Microbiologia

Tarifa BST: Consultar les tarifes actualitzades aquí.

Perfils
No aplica

Referències

• Farmacopea Europea 11ena edició

Qualitat

El BST té les certificacions de qualitat ISO 9001, ISO 14001, OSHAS 18001 i el segell d'Excel·lència Europea 500+. El BST està acreditat per CAT, JACIE-FACT, FACT-NETCORD i EFI, compleix les directrius de les Normes de Correcta Fabricació i les Normes de Correcta Distribució.