Informació tècnica
Utilitat
Totes les donacions de llet humana rebudes al Banc de Llet del Banc de Sang i Teixits passen per un control de qualitat després de ser pasteuritzades, tal com indica la Guia per la Qualitat i Seguretat dels Teixits i Cèl·lules per aplicació humana 5a edició 2022 i les recomanacions de l'EMBA (European Milk Bank Association). Segons aquestes recomanacions, la llet s'ha de controlar microbiològicament després de pasteuritzar-la i descartar els lots que no compleixen els requeriments establerts. La finalitzat d'aquest control és garantir la seguretat de la llet i evitar la possibilitat d'infeccions en els nadons que la reben.
Mètode
La Farmacopea Europea descriu en l'apartat 2.6.1 els mètodes a emprar per determinar l'esterilitat. El mètode adequat al cas de la llet és inoculació directa en medi líquid. Cal tenir en compte, però, que la llet causa una terbolesa en el medi líquid que impedeix la seva lectura visual. Per tant el control microbiològic de la llet post-pasteurització es realitza mitjançant el mètode d'inoculació directa en medi líquid, seguit de ressembra en placa d'agar utilitzant els següents medis de cultiu:
-
Agar Tripticasa Soja (TSA)
-
Brou Tripticasa Soja (TSB)
D'altra banda, donat que el Banc de Llet, en cas de detectar un lot contaminat, requereix conèixer la quantitat del microorganisme contaminant, també apliquen els apartats 2.6.12 i 2.6.13 de Farmacopea i el mètode adequat és recompte en placa.
Considerant aquests requeriments, s'ha dissenyat el protocol que es descriu a continuació i es pot veure a la Il·lustració 1.
Dins una cabina de flux laminar i utilitzant tècnica asèptica, amb la pipeta automàtica i utilitzant puntes estèrils, s'agafa 0,1 mL de llet i es diposita a la placa. Amb una nansa de Digralsky estèril s'escampa la mostra i es deixar assecar la placa. Amb una pipeta automàtica i una punta de pipeta estèril, agafar 1 mL de llet i dipositar-la al tub de medi líquid TSB. A les 24h d'incubació, amb una pipeta automàtica i una punta de pipeta estèril, agafar una mostra de 0,1 mL del medi TSB inoculat amb llet i dipositar-la a una placa TSA. Amb una nansa de Digralsky estèril escampar la mostra i deixar assecar la placa. S'incuben les plaques a 36oC +/- 1oC i es llegeixen a les 24 hores. Es compten les colònies i es calcula la concentració a la que es trobava el microorganisme a la llet.
A cada sèrie de treball s'inclouen controls positius i negatius.
Aquest mètode ha estat validat pel Banc de Sang i Teixits i el codi de validació és V-LMB-004-
Algoritme diagnòstic
Es descriu a la Il·lustració 2.
Resultats
Tenint en compte totes les recomanacions i per assegurar la màxima seguretat del producte, el Banc de Llet aplica el següent criteris d'acceptació de la llet post-pasteurització: qualsevol creixement microbià és motiu de rebuig.
Precaucions
No aplica
Temps de resposta
-
48-72 hores
Informació sobre l’espècimen
Mostra: Llet humana
Tubs: 1 tub estèril
Estabilitat: Congelada: 3 mesos. Refrigerada: 24 hores.
Instruccions de transport: Refrigerada.
Motiu de rebuig: Contenidor mal tancat, mostra no identificada, etc.
Informació administrativa
Codi BST: 63801
Codi BST antic: 7003
Descripció de la prova: Cultiu de llet post-pasteurització
Sinònims: No aplica
Secció: Microbiologia
Tarifa BST: Consultar les tarifes actualitzades aquí.
Perfils
No aplica
Referències
-
Guide to the quality and safety of tissues and cells for human application. 5th edition EDQM, 2022
-
Recommendations for the Establishment and Operation of Human Milk Banks in Europe: A Consensus Statement From the European Milk Bank Association (EMBA). Front Pediatr. 2019; 7: 53. doi: 10.3389/fped.2019.00053
-
Farmacopea Europea 11ena edició, 2023
Qualitat
El BST té les certificacions de qualitat ISO 9001, ISO 14001, OSHAS 18001 i el segell d'Excel·lència Europea 500+. El BST està acreditat per CAT, JACIE-FACT, FACT-NETCORD i EFI, compleix les directrius de les Normes de Correcta Fabricació i les Normes de Correcta Distribució.