Informació tècnica
Utilitat
-
La determinació del genotip RHD fetal a partir del DNA que es troba en forma lliure en el plasma de les gestants (cell-free DNA) permet conèixer el Grup Rh(D) del fetus de forma no invasiva i sempre en el context de gestants de fenotip RhD negatiu.
-
En gestants RhD negatiu amb anticossos anti-D, aquesta determinació permet identificar les gestacions realment de risc, en les que el fetus es confirma com a RhD positiu, evitant procediments invasius que podrien augmentar la sensibilització materna. Si per contra el fetus és D negatiu, es descarta el risc de malaltia hemolítica i per tant el seguiment es limita a l'habitual en una gestació normal.
-
En el cas de gestants RhD negatiu no sensibilitzades, el principal avantatge de l'aplicació d'aquesta tècnica és el fet de poder restringir l'administració de la gammaglobulina anti-D únicament a aquelles gestants portadores d'un fetus RhD positiu, evitant una exposició innecessària en aquelles gestants que no ho requereixin.
Mètode
Previ a la determinació del genotip RHD fetal en plasma matern, cal fer l'extracció del DNA a partir d'una alíquota de plasma separada en condicions adients per a minimitzar el risc de contaminació. Aquesta extracció es realitza de forma automatitzada amb l'extractor QIASymphony de Qiagen.
La determinació es realitza mitjançant la tècnica de PCR a temps real, utilitzant cebadors i sondes TaqMan específiques per als exons 5 i 10 del gen RHD. La determinació també inclou l'amplificació del gen SRY com a marcador específic del cromosoma Y i l'amplificació del gen CCR5 com a marcador de DNA total (matern+fetal).
Resultats
Els resultats possibles són:
-Fetus RHD Negatiu
-Fetus RHD Positiu.
-Considerar al fetus com a RHD positiu. Aquesta possibilitat es dona quan la gestant és portadora d'un gen RHD aparentment normal que emmascara la presència d'un possible gen RHD fetal i per tant no és possible determinar el genotip RHD del fetus.
En el cas de que el resultat sigui no concloent, s'informa del mateix i es sol·licita una nova mostra de la gestant per a repetir la determinació.
Temps de resposta
-
15 dies naturals des que la mostra arriba al laboratori.
Informació sobre l’espècimen
Mostra: Sang perifèrica (mostra obtinguda preferiblement en el segon trimestre)
Tub: Tub EDTA K3 10 ml
Volum mínim: 8 ml
Precaucions: Mostra extreta exclusivament per a aquesta determinació en tub vacutainer sense manipular (Per tal d'evitar contaminacions).
Informació addicional: Si fos possible, seria útil que en algun camp d'observacions o comentaris, es fes constar la setmana de gestació i si es tracta d'una gestació múltiple.
Estabilitat:
- A temperatura ambient: 5 dies
- En refrigeració: 7 dies
Instruccions de transport: temperatura ambient
Motiu de rebuig:
- Mostra molt hemolitzada.
- Mostra amb volum insuficient.
- Mostra prèviament manipulada.
Informació administrativa
Codi BST: 72502
Codi BST antic: 4950
Descripció de la prova: Genotip Rh(D) fetal en plasma matern
Sinònims: GENOTIP FETAL RhD - DNA SANG
Secció: Immunohematologia
Tarifa BST: Consultar les tarifes actualitzades aquí.
Referències
-
Lo YMD, Hjelm NM, Fidler C, Sargent IL, Murphy MF, Chamberlain PF, et al. Prenatal diagnosis of fetal RHD status by molecular analysis of maternal plasma. N Engl J Med 1998;339:1734-8
-
Finning KM, Martin PG, Soothill PW, Avent ND. Prediction of fetal D status from maternal plasma: introduction of a new noninvasive fetal RHD genotyping service.Transfusion 42;1079-1085
