Mycoplasma qPCR

Información técnica

Utilidad

Detección de contaminaciones por Mycoplasma en muestras de terapia avanzada, productos celulares, líneas celulares o sobrenadantes de cultivo, mediante un método de amplificación por qPCR Real Time, validado por la Farmacopea Europea.

La determinación de contaminación por Mycoplasma en el material de partida, productos intermedios y productos finales de medicamentos celulares, es necesaria como control de calidad del proceso productivo, según las Normas de Correcta Fabricación (NCF).

Método

Mycoplasma es un género de bacterias que no tienen pared celular. Esta característica hace que sean resistentes a muchos antibióticos, como la penicilina. Algunas especies de Mycoplasma pueden ser causantes de patologías en humanos. Además, estos bacterias se pueden encontrar contaminando material de laboratorio y cultivos celulares, reduciendo el rendimiento y la viabilidad del cultivo, sin que la contaminación pueda ser detectada al microscopio. Según la Farmacopea Europea hay varios métodos permitidos para detectar Mycoplasma. En el BST se utiliza la qPCR (reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa), técnica que permite amplificar ADN específico en tiempo real, utilizando la fluorescencia como método de cuantificación.

Para realizar la extracción de los ácidos nucleicos se utiliza el kit QIAamp blood DNA extraction kit (Qiagen). Para la qPCR se utiliza el kit Venor GeM qEP (Minerva Biolabs), con tecnología de sondas TaqMan. La sensibilidad de la técnica es de ≤10 CFU/mL. El kit incluye un control interno que permite garantizar que no haya inhibición de la PCR. Además, en cada serie de trabajo se incorporan controles positivos y negativos.

Este método ha sido validado por el Banc de Sang i Teixits y el código de validación del método es V-LC-030 y el código de la validación de cada una de las matrices es V-LC-027.

Algoritmo diagnóstico

No aplica.

Resultados

El resultado se informa como POSITIVO o NEGATIVO.

Precauciones

No aplica.

Tiempo de respuesta

• 10 días (si es urgente se puede realizar en 2 días, contactar con el Laboratorio)

Información sobre el espécimen

Muestra: Producto, medio o reactivo

Tubos: Tubo estéril

Estabilidad: Congelado 1 mes.

Instrucciones de transporte: Preferiblemente congelado.

Motivo de rechazo: Muestra no identificada, etiqueta ilegible, etc.

Información administrativa

Código BST: 75800

Código BST antiguo: CEL055

Descripción de la prueba: Mycoplasma por qPCR

Sinónimos: Mycoplasma

Sección: Microbiología

Tarifa BST: Consulte las tarifas actualizadas aquí.

Perfiles
No aplica

Referencias

• Farmacopea Europea 11ena edició